A Opera del Duomo, também conhecida como Opera di Santa Maria del Fiore, é uma instituição laica fundada pela Republica Florentina no ano de 1296 para controlar e fiscalizar os trabalhos durante a construção da nova Catedral e do Campanário.

Mais tarde, quando a catedral foi terminada, a atividade principal da Opera del Duomo foi tutelar e conservar os monumentos: a Catedral, o Campanário e o Batistério, função essa que existe até os dias de hoje. 

No ano de 1891 foi criado o Museu para hospedar todas as obras de artes que durante todos esses séculos foram retiradas do Duomo e do Batistério. 

 O Museu Opera del Duomo, normalmente não se encontra nas listas dos museus mais indicados para visitas na cidade de Florença, mas para quem ama o estilo e a escutura gótica, ou até mesmo quem aprecia a obra de Donatello, o museu pode representar um verdadeiro tesouro escondido. O pequeno fluxo de turista nesse museu, pode permitir uma prazeirosa visita.

O museu expoem os materiais de construção e os intrumentos que foram utilizados pelo arquiteto Brunelleschi durante a realização da Cupola del Duomo de Florença. 

Entre o primeiro e o segundo andar, encontramos a Pietá de Michelangelo escupilda no ano de 1550. Alguns historiadores afirmam que Michelangelo esculpiu a obra como parte do seu monumento fúnebre. De fato, a figura do personagem de Nicodemos é normalmente interpretada como um autorretrato do maestro.

A sala principal do segunda andar hospeda duas cantorias em pedra, que em origem faziam parte da decoração do Duomo: uma esculpida por Luca della Robbia (1431-38) e outra por Donatello (1433-39). É possível assim, confrontar esses dois grandes artistas do Renascimento florentino: os meninos do Della Robbia são calmos e vivazes enquanto cantam; a obra de Donatello em vez, nos transmite um certo vigor.

Na sala á esquerda são expostos os paineis  originais, em baixo relevo, do Campanário - obra de Pisano.

No claustro é exposta a porta original feita por Ghiberti para o Batistério - conhecida mundialmente como Porta do Paraíso.